Грамположительных бактерий

Цитоплазматическая мембрана при электронной микроскопии ультратонких срезов представляет собой трехслойную мембрану (2 темных слоя толщиной по 2,5 нм разделены светлым — промежуточным). По структуре она похожа на плазмалемму клеток животных и состоит из двойного слоя фосфолипидов с внедренными поверхностными, а также интегральными белками, как бы пронизывающими насквозь структуру мембраны. При избыточном росте (по сравнению с ростом клеточной стенки) цитоплазматическая мембрана образует инвагинаты — впячивания в виде сложно закрученных мембранных структур, называемые мезосомами. Менее сложно закрученные структуры называются внутрицитоплазматическими мембранами.

Цитоплазма

Цитоплазма состоит из растворимых белков, рибонуклеиновых кислот, включений и многочисленных мелких гранул — рибосом, ответственных за синтез (трансляцию) белков. Рибосомы бактерий имеют размер около 20 нм и коэффициент седиментации 70S, в отличие от 80S-рибосом, характерных для эукариотических клеток. Рибосомные РНК (рРНК) — консервативные элементы бактерий («молекулярные часы» эволюции). 16S рРНК входит в состав малой субъединицы рибосом, а 23S рРНК — в состав большой субъединицы рибосом. Изучение 16S рРНК является основой геносистематики, позволяя оценить степень родства организмов.
В цитоплазме имеются различные включения в виде гранул гликогена, полисахаридов, бета-оксимасляной кислоты и полифосфатов (волютин). Они являются запасными веществами для питания и энергетических потребностей бактерий. Волютин обладает сродством к основным красителям и легко выявляется с помощью специальных методов окраски (например, по Нейссеру) в виде метахроматических гранул. Характерное расположение гранул волютина выявляется у дифтерийной палочки в виде интенсивно прокрашивающихся полюсов клетки.

Нуклеоид

Нуклеоид — эквивалент ядра у бактерий. Он расположен в центральной зоне бактерий в виде двунитевой ДНК, замкнутой в кольцо и плотно уложенной наподобие клубка. Ядро бактерий, в отличие от эукариот, не имеет ядерной оболочки, ядрышка и основных белков (гистонов). Обычно в бактериальной клетке содержится одна хромосома, представленная замкнутой в кольцо молекулой ДНК.
Кроме нуклеоида, представленного одной хромосомой, в бактериальной клетке имеются внехромосомные факторы наследственности — плазмиды, представляющие собой ковалентно замкнутые кольца ДНК.

Капсула, микрокапсула, слизь

Капсула — слизистая структура толщиной более 0,2мкм, прочно связанная с клеточной стенкой бактерий и имеющая четко очерченные внешние границы. Капсула различима в мазках-отпечатках из патологического материала. В чистых культурах бактерий капсула образуется реже. Она выявляется при специальных методах окраски мазка (например, по Бурри-Гинсу), создающих негативное контрастирование веществ капсулы: тушь создает темный фон вокруг капсулы. Капсула состоит из полисахаридов (экзополисахаридов), иногда из полипептидов, например, у сибиреязвенной бациллы она состоит из полимеров D-глутаминовой кислоты. Капсула гидрофильна, препятствует фагоцитозу бактерий. Капсула антигенна: антитела против капсулы вызывают ее увеличение (реакция набухания капсулы).
Многие бактерии образуют микрокапсулу — слизистое образование толщиной менее 0,2мкм, выявляемое лишь при электронной микроскопии. От капсулы следует отличать слиэь — мукоидные экзополисахариды, не имеющие четких границ. Слизь растворима в воде.
Бактериальные экзополисахариды участвуют в адгезии (прилипании к субстратам), их еще называют гликокаликсом. Кроме синтеза
экзополисахаридов бактериями, существует и другой механизм их образования: путем действия внеклеточных ферментов бактерий на дисахариды. В результате этого образуются декстраны и леваны.

Жгутики

Жгутики бактерий определяют подвижность бактериальной клетки. Жгутики представляют собой тонкие нити, берущие начало от цитоплазматической мембраны, имеют большую длину, чем сама клетка. Толщина жгутиков 12-20 нм, длина 3-15 мкм. Они состоят из 3 частей: спиралевидной нити, крюка и базального тельца, содержащего стержень со специальными дисками (1 пара дисков — у грамположительных и 2 пары дисков — у грамотрицательных бактерий). Дисками жгутики прикреплены к цитоплазматической мембране и клеточной стенке. При этом создается эффект электромотора со стержнем-мотором, вращающим жгутик. Жгутики состоят из белка — флагеллина (от flagellum — жгутик); является Н-антигеном. Субъединицы флагеллина закручены в виде спирали.
Число жгутиков у бактерий различных видов варьирует от одного (монотрих) у холерного вибриона до десятка и сотен жгутиков, отходящих по периметру бактерии (перитрих) у кишечной палочки, протея и др. Лофотрихи имеют пучок жгутиков на одном из концов клетки. Амфитрихи имеют по одному жгутику или пучку жгутиков на противоположных концах клетки.

Пили

Пили (фимбрии, ворсинки) — нитевидные образования, более тонкие и короткие (3-10нм х 0, 3-10мкм) , чем жгутики. Пили отходят от поверхности клетки и состоят из белка пилина, обладающего антигенной активностью. Различают пили, ответственные за адгезию, то есть за прикрепление бактерий к поражаемой клетке, а также пили, ответственные за питание, водносолевой обмен и половые (F-пили), или конъюгационные пили. Пили многочисленны — несколько сотен на клетку. Однако, половых пилей обычно бывает 1-3 на клетку: они образуются так называемыми «мужскими» клетками-донорами, содержащими трансмиссивные плазмиды (F-, R-, Col-плазмиды). Отличительной особенностью половых пилей является взаимодействие с особыми «мужскими» сферическими бактериофагами, которые интенсивно адсорбируются на половых пилях.

Споры

Споры — своебразная форма покоящихся фирмикутных бактерий, т.е. бактерий
с грамположительным типом строения клеточной стенки. Споры образуются при неблагоприятных условиях существования бактерий (высушивание, дефицит питательных веществ и др.. Внутри бактериальной клетки образуется одна спора (эндоспора). Образование спор способствует сохранению вида и не является способом размножения, как у грибов. Спорообразующие бактерии рода Bacillus имеют споры, не превышающие диаметр клетки. Бактерии, у которых размер споры превышает диаметр клетки, называются клостридиями, например, бактерии рода Clostridium (лат. Clostridium — веретено). Споры кислотоустойчивы, поэтому окрашиваются по методу Ауески или по методу Циля-Нильсена в красный, а вегетативная клетка в синий цвет.

Форма спор может быть овальной, шаровидной; расположение в клетке -терминальное, т.е. на конце палочки (у возбудителя столбняка), субтерминальное — ближе к концу палочки (у возбудителей ботулиэма, газовой гангрены) и центральное (у сибиреязвенной бациллы). Спора долго сохраняется из-за наличия многослойной оболочки, дипиколината кальция, низкого содержания воды и вялых процессов метаболизмов. В благоприятных условиях споры прорастают, проходя три последовательные стадии: активация, инициация, прорастание.

Proteusspp., Е.соИ. Оптимизированы условия поможет подобрать адекватную раннюю ан-

ПЦР, что позволяет проводить реакцию в те- тибактериальную терапию.

чение 40-50 минут, а также дает надежду на Работа выполнена при поддержке ФЦП

проведение множественной ПЦР, так как тем- «Научные и научно-педагогические кадры

пературы отжига всех праймеров почти сов- инновационной России на 2009-2013 гг.» в

падают, а размеры ампликонов различаются. рамках реализации мероприятия 1.2.1 (ГК

Быстрая этиологическая диагностика ОКИ П385 от 30.07.2009).

Сведения об авторах статьи:

Кулуев Булат Резяпович — доцент кафедры фундаментальной и прикладной микробиологии БГМУ, Е-mail: Kuluev@bk.ru Хайдарова Джамиля Якуповна — аспирант кафедры кафедры фундаментальной и прикладной микробиологии БГМУ.

Е-mail: Dislam.86@mail.ru

Дубровская Дина Наилевна — аспирант кафедры инфекционных болезней БГМУ. Е-mail: Dina_8383@mail.ru Мавзютов Айрат Радикович — д.м.н., профессор, зав. кафедрой фундаментальной и прикладной микробиологии БГМУ.

Е-mail: Ufalab@mail.ru.

ЛИТЕРАТУРА

1. Инфекционная заболеваемость в Российской Федерации за 2005 год // Детские инфекции. — 2006. — №1. — С.3.

2. Учайкин, В.Ф. Решенные и нерешенные проблемы инфекционной патологии у детей / В.Ф. Учайкин // Педиатрия. — 2004. — №4.

— С.7-11.

5. Нисевич, Н.И. Современные проблемы инфекционной заболеваемости у детей / Н.И. Нисевич // Педиатрия. — 1995. — №4. -С.67-69.

УДК 616-022.363

© Г.Ф. Хасанова, А.Р. Мавзютов, И.А. Мирсаяпова, С.Г. Хасанова, Г.Д. Хазеева, Р.Ш. Магазов, Н.Н. Ворошилова, 2012

Г.Ф. Хасанова, А.Р. Мавзютов, И.А. Мирсаяпова,

С.Г. Хасанова, Г.Д. Хазеева, Р.Ш. Магазов, Н.Н. Ворошилова ЭТИОЛОГИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ И АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ НЕФЕРМЕНТИРУЮЩИХ ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫХ БАКТЕРИЙ В КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития Росии. г. Уфа

Исследовано 719 клинических штаммов неферментирующих грамотрицательных бактерий, выделенных из клинического материала (образцы отделяемого ран, мокроты, мочи). Установлено, что удельный вес случаев выделения в клиническом материале неферментирующих грамотрицательных бактерий составили в 2009 году 4,45%, в 2010 году 5,5%, в 2011 году 6,7%. Наиболее часто неферментирующие грамотрицательные бактерии выявлялись при инфекциях нижних дыхательных путей-7,1%, при гнойно-септических процессах-5,1%, при урогенитальной патологии 4,33%. По видовому составу в киническом материале чаще обнаруживались Pseudomonas aeruginosa и Acinetobacter baumanii, при этом отмечена тенденция к увеличению количества случаев выявления Pseudomonas alcaligenes, Stenotrophomonas maltophylia, Acinetobacter christensenii, Pseudomonas putida. Исследованные штаммы P. aeruginosa отличались высокой резистентностью к пипера-циллину, цефепиму, цефтазидиму, цефоперазону, цефотаксиму. В отношении Acenitobacter spp. наибольшую активность проявляли меропенем, тобрамицин, нетилмицин и амикацин.

Ключевые слова: неферментирующие грамотрицательные бактерии, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumanii, антибиотикорезистентность.

G.F. Khasanova, A.R. Mavzyutov, I.A. Mirsayapova,

В последние годы возросла частота выявления у пациентов, находящихся на стационарном лечении в хирургических и реанимационных отделениях, неферментирующих грамотрицательных аэробных бактерий (НФБ), существенно расширился их видовой состав. В клиническом материале наряду с Pseudomonas aeruginosa и Acinetobacter spp. все чаще обнаруживаются микроорганизмы (Stenotrophomonas maltophiliahilia, Burkhol-deria cepacia, Moraxella spp., Chryseobacterium spp. и др.), о роли которых в этиологии заболеваний человека известно крайне мало. Наибольшую тревогу при этом вызывает тот факт, что клинические штаммы указанных микроорганизмов характеризуются низкой чувствительностью к целому ряду антибактериальных препаратов. Это предполагает необходимость мониторирования эпидемиологической ситуации и поиск новых антибиотиков .

Цель исследования. Установить этиологическое значение и антибиотикорезистент-ность неферментирующих грамотрицатель-ных бактерий, выделенных при воспалительной патологии человека.

Материал и методы

Из отделяемого ран, мокроты и мочи больных, находившихся на стационарном лечении в МУ ГКБ №21 городского округа г. Уфа было выделено 719 клинических штаммов НФБ, идентифицированных по морфологическим, культуральным и биохимическим (API 20NE, bioMerieux, Франция) признакам. Определение антибиотикочувствительности P. aeruginosa осуществляли диско-

диффузионым методом в агаре Мюллера-Хинтона. Для тестирования использовали бактериальную суспензию, соответствовавшую стандарту мутности 0,5 McFarland, диски с антибиотиками (НИЦФ, Россия; «Хай Медиа», Индия). Инкубацию посевов осуществляли при 37°С в течение 18-20 ч. Для контроля качества использовали контрольные штаммы P. aeruginosa ATCC 27853 и E. ^liATCC 25922) и критерии NCCLS.

Ввод, статистическую обработку и анализ данных проводили с помощью компьютерной программы Мю1геойЕхсе1.

шш

Рис. 1. Высеваемость НФБ по годам в процентах

Наиболее часто неферментирующие грамотрицательные бактерии выявлялись при инфекциях нижних дыхательных путей-7,1%, при гнойно-септических процессах НФБ обнаруживались в 5,1% и в 4,33% при урогенитальной патологии (рис. 2).

10,9

гнойно-септические урогенитальные инфекции нижних

инфекции инфекции дьхательньх путей

I в 2009 12010 □ 20111 Рис. 2. Сравнительная структура высеваемости НФБ при инфекциях различной локализации по годам в процентах

По видовому составу в клиническом материале чаще обнаруживались P.aeruginosa и A.baumanii. При этом отмечена тенденция к увеличению количества случаев выявления микроорганизмов, ранее высевавшихся крайне редко: Pseudomonas alcaligenes, Stenotro-phomonasmaltophylia, Acinetobacter

christensenii, Pseudomonas putida (рис. 3).

□

— 94% и цефотаксиму — 87% культур, тогда как к меропенему лишь 39% исследованных штаммов. Относительно высокой в отношении P. aeruginosa оставалась эффективность аминогликозидов, поскольку к тобрамицину резистентными оказались только 48% штаммов, а к амикацину — 51%.

Несколько иными были результаты тестирования антибиотикочувствительности клинических штаммов Acenitobacter spp. В частности, чувствительность к меропенему показали 75% культур, к тобрамицину — 52%, к нетилмицину — 50% и к амикацину — 30%.

Работа выполнена в соответствии с ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России на 2009-2013 гг.» ГК №П385 от 30.07.2009 г.

Сведения об авторах статьи:

Хасанова Гузель Фаузавиевна — аспирант кафедры фундаментальной и прикладной микробиологии БГМУ.

Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина,3. E-mail: HasanovaGF@rambler.ru

Мавзютов Айрат Радикович — д.м.н., профессор, зав. кафедрой фундаментальной и прикладной микробиологии БГМУ.

Адрес: 450000, г.Уфа, ул. Ленина,3. E-mail: Ufalab@mail.ru.

Мирсаялова Ирина Анатольевна — аспирант кафедры фундаментальной и прикладной микробиологии БГМУ.

Адрес: 450000, г.Уфа, ул. Ленина,3.

Хасанова Суфия Гайсеевна — зав. бактериологической лабораторией МУ ГКБ № 21 г Уфы.

Хазеева Гузель Дамировна — ассистент кафедры фундаментальной и прикладной микробиологии.

Адрес: 450000, г.Уфа, ул. Ленина,3.

ЛИТЕРАТУРА

7. Drusano GL. Prevrntion of resistance: a goal for dose selection of antimicrobials agents. Clin Infect Dis 2003; 36: 42-52.

УДК 617-089 Д44

© Р.З. Латыпов, В.В. Плечев, А.В. Чабин, 2012

Р.З. Латыпов, В.В. Плечев, А.В. Чабин ПОКАЗАНИЯ К ВЫПОЛНЕНИЮ ОРГАНОСОХРАНЯЮЩИХ ОПЕРАЦИЙ НА ТОЛСТОЙ КИШКЕ ПРИ ВИСЦЕРОПТОЗЕ

ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, г. Уфа

В статье отражены вопросы диагностики и показания к органосохраняющему хирургическому лечению нарушений флексуральной проходимости толстой кишки у больных, страдающих висцероптозом.

Ключевые слова: висцероптоз, толстая кишка, проходимость флексур, поперечник, индекс.

□ P. aeruginosa ■ A. baumanii

□ P. alcaligenes H S. maltophylia

□ A. christensenii Ш P. putida

В B. cepaciae

□ P. mendocina a P. fuorescens

□ редкие

Рис. 3. Структура выделенных штаммов НФБ

P.aeruginosa преимущественно обнаруживались при гнойно-септических и урогенитальных инфекциях, A.baumanii — при инфекциях нижних дыхательных путей.

Клинические штаммы P. aeruginosa характеризовались множественной резистентностью к антибиотикам, в частности к бета-лактамным антибиотикам и цефалоспоринам. К пиперациллину были резистентны 76% клинических штаммов P. aeruginosa, цефепи-му — 96%, цефтазидиму — 86%, цефоперазону

2.1 Строение бактериальных клеточных стенок

Клеточные стенки бактерий представляют собой жесткие пористые замкнутые структуры, обеспечивающие клеткам защиту от физических воздействий. Поскольку свободно живущие бактерии могут часто попадать в гипотоническую среду (в отличие от клеток высших животных, всегда погруженных во внеклеточную жидкость с постоянным осмотическим давлением), эти бактерии должны иметь жесткие клеточные стенки, препятствующие набуханию и разрыву клеточной мембраны. Помимо прочего бактериальные клеточные стенки (БКС) также:

1) принимают участие во многих физиологических процессах,

2) БКС содержат также материал, выступающий в роли антигена, когда бактерии проникают в организм позвоночных, в результате у последних развивается иммунитет к этим бактериям,

3) отдельные участки клеточной стенки могут сообщаться сквозь мембрану с внутренними частями клетки.

Традиционно все бактерии разделяют на две части, используя простой эмпирический критерий, называемый окраской по Граму, основанный на последовательной обработке бактерий тремя красителями (кристаллическим фиолетовым, йодом, сафранином). У грамположительных бактерий клеточные стенки содержат мало липидов, а у грамотрицательных клеточные стенки, напротив богаты липидами. И у тех и у других жесткий каркас образуется в результате ковалентного связывания полисахаридных и пептидных цепей. Однако, к этой структурной основе присоединяются некоторые специфические для данной бактерии компоненты, которые у грамположительных и грамотрицательных бактерий имеют разный состав.

Жесткий каркас бактерии представляет собой одну крупную мешкообразную молекулу сложного полисахарид-пептида (полигликана или муреина). Муреиновые мешки состоят из параллельных полисахаридных цепей, связанных друг с другом в поперечном направлении короткими пептидными цепями (рис. 5). Основной повторяющейся единицей полисахаридных цепей служит муропептид — дисахар, в котором N-ацетил-D глюкозамин соединен p(1 R 4) связью с N-ацетилмурамовой кислотой.

Таким образом, основная черта муреинового мешка — наличие в нем сети параллельных полисахаридных цепей, связанных многочисленными пептидными поперечными связями. Эта сеть замкнута со всех сторон, благодаря чему бактерия полностью окружена структурой, не имеющей разрывов. Сеть может быть достаточно плотной (Staphylococcus aureus) или более рыхлой (Escherichia coli), в зависимости от числа поперечных связей.

Стенки бактериальных клеток содержат еще и некоторые сопутствующие компоненты, которые у разных бактерий варьируются. У грамположительных бактерий это тейхоевые кислоты, полисахариды, полипептиды или белки. У грамотрицательных бактерий больше сопутствующих компонентов, вплетенных в муреиновую сеть. Это полипептиды, липопротеины, сложные липополисахариды. Все эти компоненты наделяют клетки грамотрицательных бактерий сложной антигенной специфичностью, а также акцепторной специфичностью по отношению к вирусам.

Таким образом, клеточная стенка грамположительной бактерии представляет собой жесткий хрупкий корпус бактерии, а клеточные стенки грамотрицательных бактерий имеют мягкое покрытие, богатое липидами и укрывающее лежащий под ними муреиновый скелет (рис. 6).