Криоконсервация

После переноса эмбрионов в полость матки достаточно часто остается один или несколько эмбрионов. Если оставшиеся эмбрионы высокого качества, их можно заморозить и хранить в течении нескольких лет в жидком азоте при температуре -196°С.
Заморозку эмбрионов можно проводить на различных стадиях развития, однако наиболее эффективным на сегодняшний день считается криоконсервация эмбрионов на пятые или шестые сутки развития. В этом случае увеличивается количество критериев оценки качества эмбрионов, что позволяет выбрать наиболее жизнеспособные из них. Для криоконсервации пригодны эмбрионы только высокого качества, так как в этом случае повышается вероятность успешного их размораживания, развития и последующей имплантации. Не смотря на то, что для замораживания отбираются эмбрионы только высокого качества, существует небольшая вероятность того, что эмбрион не разморозится или разморозится не качественно. Происходит это из-за того, что все эмбрионы обладают различной криорезистентностью, то есть переносимостью низких температур.
Криоконсервация (заморозка) – сложная процедура. Эмбрион человека содержит достаточно много воды, которая при замораживании образует кристаллы льда, способные повредить клетки эмбриона. Поэтому используются специальные среды, предотвращающие образование кристаллов льда. Благодаря этому большая часть эмбрионов хорошо переносит заморозку. Эмбрионы, хорошо перенесшие эту процедуру, дают высокий процент наступления беременности.
В каких случаях необходима криоконсервация?
К сожалению, не все циклы ЭКО заканчиваются наступлением беременности и родами. В случае отрицательного результата можно воспользоваться своими замороженными эмбрионами в последующих циклах и увеличить шансы наступления беременности после одной стимуляции. Иногда перенос эмбрионов отменяется по медицинским показаниям – в этом случае замораживаются все эмбрионы высокого качества и переносятся в полость матки, когда организм женщины достаточно подготовлен к предстоящей беременности. Криоконсервированные эмбрионы могут храниться в жидком азоте в течении нескольких лет – при соблюдении условий хранения длительность хранения никак не сказывается на качестве и жизнеспособности эмбрионов. Кроме того, с финансовой точки зрения криоконсервация и хранение эмбрионов обычно обходится намного дешевле, чем новый цикл стимуляции яичников.
Эмбрионы можно хранить и после успешных родов, ведь через некоторое время можно получить еще одну беременность без новой стимуляции.

Фото: Meghan Thompson

Зачем нужно замораживать яйцеклетки?

Сухая статистика показывает, что современные женщины решаются на материнство все ближе к бальзаковскому возрасту. Если наши бабушки к 26 годам уже успевали родить целую футбольную команду, то их внучки только готовятся к бессонным ночам и подписываются на блоги «супермам», а европейские женщины берут еще пару лет отсрочки и не планируют даже думать о детях ранее 28 лет. В то время как еще двадцать лет назад первенцы у наших соотечественниц появлялись в 20–21 год. Как отмечают эксперты, тенденция все дальше откладывать беременность продолжается и некоторые специалисты ее поддерживают.

Ученый Джон Мироуски из Университета Техаса определил идеальный возраст для рождения первого ребенка — 34 года. К этому времени у женщины больше знаний о беременности и родах, ее организм — зрелый и легко переносит гормональные перепады, а психологически она более устойчива, чем, например, десятью годами ранее.

Наука легко обосновывает эту цифру и предлагает решение тем, кто не спешит стать родителем, но и не хочет опоздать: криоконсервация (заморозка) ооцитов — яйцеклеток в ранней стадии развития.

Фото: Kelly Sikkema

Есть ли риск для женщины?

На постсоветском пространстве замораживание яйцеклеток — не самая распространенная процедура, хотя первые опыты в этой области проводились еще в СССР. В мире же ее активно используют миллионы женщин. Например, в Испании даже появилось понятие «репродуктивного туризма» — именно сюда приезжает практически каждая вторая женщина, желающая заморозить яйцеклетки. Здесь не только эффективно лечат бесплодие, но и популяризируют современные технологии. Так что для испанок процесс сбора и заморозки яйцеклеток стал обыденностью.

Кто из знаменитостей уже делал это?

Сегодня адептами отложенного материнства все чаще становятся медийные мамы. К криоконсервации прибегла одна из самых популярных Instagram-блогеров Ким Кардашьян. Позже ее примеру последовала и старшая сестра — Кортни Кардашьян, у которой уже есть трое детей. В ближайшее время звезда американского реалити-шоу «Семейство Кардашьян» не планирует рожать, но и не хочет лишиться шанса сделать это в будущем. Инъекции препарата для стимуляции овуляции Кортни делала в домашних условиях и рассказывала об этом в одном из выпусков шоу.

Своим опытом заморозки яйцеклеток делилась и певица Рита Ора. В интервью она призналась, что впервые узнала о криоконсервации от лечащего врача, когда ей было 20 лет. Желание иметь семью в будущем помогло ей решиться на этот шаг. По таким же соображениям пошла на процедуру и актриса Дженнифер Энистон.

В России криоконсервация появилась в 2014 году. Пионером среди отечественных знаменитостей, использовавших этот метод, была Алла Пугачева, и в возрасте 64 лет, благодаря суррогатной матери, у певицы родились близнецы.

Как это происходит?

Криоконсервация ооцитов рекомендована женщинам с обнаруженным онкологическим заболеванием (строго до начала лечения), а также при планируемых операциях на яичниках и высоком риске ранней менопаузы.

Врачи советуют не затягивать: оптимальный возраст извлечения яйцеклеток — 18–35 лет. Ведь со временем не только уменьшается их число (из-за чего могут возникнуть проблемы с зачатием), но и ухудшается качество. Доказано, что у мам старше 40 лет увеличивается риск рождения ребенка с отклонениями.

Процедура криоконсервации проходит в несколько этапов.

1. Стимуляция овуляции. Процесс проходит под контролем врача, а результат достигается при помощи введения индивидуально подобранных медикаментов. В среднем этот этап длится 8–12 дней.
2. Сбор ооцитов. Все манипуляции занимают 10–20 минут и проводятся под анестезией. Яйцеклетки извлекаются введенной во влагалище иглой (это называется «трансвагинальная пункция»).
3. Быстрая заморозка — витрификация. Она проходит в несколько этапов. Первый: яйцеклетку подготавливают и обрабатывают раствором с криопротекторами для защиты при замораживании. Второй: клетки (не более четырех) переносят в специальную емкость (крионоситель). Третий: резервуар помещается в жидкий азот с температурой хранения –196 °C.
4. Нанесение маркировки, включающей данные пациентки и дату заморозки яйцеклетки.

Почему важно защитить клетки специальным составом? Из-за высокого содержания воды при замораживании образуются кристаллы, которые могут повредить клетки. Обработка помогает сохранить их целостность без какого-либо негативного воздействия, при этом здоровыми и способными к дальнейшему использованию после криоконсервации остаются 95–98% из них.

Что делать, если передумаешь?

Отложенное материнство пришло в нашу жизнь не так давно, однако уже есть случай хранения (и последующего успешного использования) клетки, которая провела в заморозке 14 лет. Ограничений по сроку годности таких яйцеклеток на сегодня нет. Но есть нюанс: хранение биологического материала — процедура не бесплатная. Цена этой сложной услуги складывается из продолжительности хранения, количества замораживаемых яйцеклеток и даже местоположения и известности самой клиники.

У женщины всегда есть право передумать: использовать клетки или хранить. В этом случае необходимо оформить отказ в медицинском учреждении, где проходила процедура. Неиспользованный материал с разрешения пациентки может быть передан в донорский банк либо утилизирован.

Специалисты во всем мире уверены: из-за того что первая беременность наступает все позже, популярность процедуры будет расти. Неважно, по какой причине женщина не может быть матерью прямо сейчас, — современная медицина способна сохранить для нее эту возможность. Еще 30 лет назад это казалось фантастикой, но сегодня ход биологических часов можно если не остановить, то немного замедлить.

Ксения Рувалова

Запишитесь на консультацию к врачу-репродуктологу в клинику «Скандинавия АВА-ПЕТЕР». Он ответит на все самые важные и волнующие вопросы, подскажет, как действовать и что необходимо сделать, чтобы приблизиться к своей мечте.

Подробнее о возможностях криобанка «Скандинавии АВА-ПЕТЕР» читайте .

Позвонить

Материал подготовлен в партнерстве с клиникой «Скандинавия АВА-ПЕТЕР». Лицензия № ЛО-78-01-009838 13 мая 2019 г.

Программа экстракорпорального оплодотворения очень часто сопровождается получением большего количества эмбрионов, чем требуется для одной подсадки. При желании их можно сохранить для последующих попыток ЭКО, ведь неизвестно, наступит ли беременность в этом цикле, и будет ли она развиваться. Кроме того, в дальнейшем семейная пара может принять решение о рождении еще одного ребенка, поэтому чтобы лишний раз не нагружать организм матери, многие клиники предлагают услуги криоконсервации эмбрионов.

Криоконсервация — способ хранения биоматериала в условиях низкой температуры длительное время, что предполагает возможность размораживания и восстановления его биологических функций. Криоконсервация применяется в перинатальном центре с 2011 года, за 7 лет практики успешно проведено 728 циклов.

С 2018 года услуга по криоконсервации эмбрионов осуществляется в рамках базовой программы обязательного медицинского страхования (ОМС).

Специалисты рекомендуют пациентам проводить криоконсервацию эмбрионов при:

• участии в программе суррогатного материнства;
• получении большого количества «качественных» эмбрионов для их использования в последующих попытках ЭКО;
• возникновении у женщины любого болезненного состояния в цикле ЭКО (например, вирусное заболевание, синдром гиперстимуляции яичников или экстренная операция). Эта ситуация резко снижает шансы на зачатие, поэтому полученных эмбрионов подсаживают в более благоприятное время.

Окончательное решение о необходимости и возможностях замораживания принимается врачом и эмбриологом индивидуально для каждой пары.

«Плюсы» и «минусы» криоконсервации эмбрионов

Программа криоконсервации имеет ряд существенных преимуществ:

• повышение индивидуальной вероятности наступления беременности;
• снижение числа повторных стимуляций яичников и пункций фолликулов, что значительно снижает медикаментозную нагрузку на женский организм;
• значительная экономия средств пациентов на приобретение дополнительных лекарств;
• предупреждение синдрома гиперстимуляции яичников;
• возможность зачатия ребенка через несколько лет, в том числе и после лечения онкологических заболеваний;
• возможность донорской передачи эмбрионов другим бесплодным семьям.

Однако важным недостатком программы является вероятность потери части эмбрионов в процессе замораживания и размораживания. По этой причине каждой паре следует обсудить со специалистами все детали и особенности криоконсервации с целью сохранения большего числа эмбрионов.

Как проводится криоконсервация?

1. В разных центрах по лечению бесплодия процедура криоконсервации может проводиться на разных стадиях эмбрионального развития: оплодотворенные яйцеклетки, четырех- или восьмиклеточные эмбрионы, бластоцисты. Главное условие — их хорошее качество для увеличения вероятности выживаемости после разморозки и заморозки.
2. В начале программы эмбрионы помещаются в криопротекторную среду с особыми препаратами, защищающими клетки от повреждения. Эти вещества не вызывают образования кристаллов льда внутри эмбрионов, а позволяют цитоплазме клеток находиться в гелеподобном состоянии и в дальнейшем восстанавливать свои свойства.
3. Далее эмбрионов переносят в микроконтейнеры — пластиковые трубочки с индивидуальными маркерами, в каждой из которых их может быть по 4-5 единиц, помещают в криобанк и охлаждают. При этом процесс охлаждения может проводиться двумя способами: медленное и сверхбыстрое замораживание (витрификация).
4. Замороженные эмбрионы хранятся столько, сколько необходимо — от нескольких месяцев до нескольких десятков лет, и оплачивать срок их хранения следует заранее. Каждая пара по окончании этого периода должна решить дальнейшую судьбу своих эмбрионов: их можно утилизировать, хранить дальше, перенести в матку, оставить для научных исследований, перевезти в другую клинику или передать в качестве донорства другой бесплодной паре.
5. При необходимости разморозить материал трубочки вынимают из жидкого азота, оттаивают при комнатной температуре, эмбрионов извлекают из криопротектора и помещают в специальную благоприятную среду. День переноса зависит от стадии, на которой эмбрионы были заморожены: бластоцисты и дробящиеся эмбрионы можно переносить в матку в тот же день, а за менее развитыми зародышами нужно наблюдать в течение суток после оценки их способности к дроблению.
6. Перенос криоконсервированных эмбрионов может проводиться в естественном, стимулированном цикле или цикле с заместительной гормональной терапией. Все эти методы имеют схожую частоту имплантации и наступления беременности, поэтому их выбор зависит от мнения врача и репродуктивных проблем пары.

Влияет ли криоконсервация эмбрионов на результат ЭКО и развитие детей?

1. Сам процесс хранения эмбрионов в замороженном виде не влияет на дальнейшее их развитие эмбрионов.
2. В целом же, результат переноса зависит от множества факторов: возраста, правильности медикаментозной поддержки, числа перенесенных эмбрионов, а количество осложнений (выкидыши, неразвивающиеся и внематочные беременности) сопоставимо со стандартной программой ЭКО.
3. Дети, рожденные в результате беременности с использованием размороженных эмбрионов, ничем не отличаются от других: это подтверждено огромным числом малышей, появившихся на свет в результате «крио-беременностей».

Конечно, мы понимаем, что Вам хочется получить результат быстрее. В вашем случае-ключевое слово быстрее, в нашем — результат. Эмбриологи день и ночь растят эмбриончики, врачи-репродуктологи ваш эндометрий, доверьтесь нам, чтобы в дальнейшем Вы могли растить сыночка или дочку!

Эффективность ЭКО в многом зависит от того, как протекает эмбриологический этап: от качества полученных женских и мужских половых клеток, от того, как произошло оплодотворение яйцеклеток, а потом как происходит развитие эмбрионов при культивировании. На каждом этапе может произойти сбой, который явится причиной неудачи ЭКО. Рассмотрим основные моменты.

1. «Ооцитарный фактор» — это получение в цикле ЭКО яйцеклеток плохого качества. Общеизвестный факт, что с возрастом женщины качество ооцитов стремительно ухудшается.

У пациенток младше 35 лет, довольно редко, но также возможно получение яйцеклеток низкого качества. В таких ситуациях крайне сложно ответить на вопрос, с чем может быть это связано, но, как правило, с генетикой, с гормональной стимуляцией, эндометриозом, с различными эндокринными нарушениями (особенно часто с ожирением).

Сейчас активно ведутся исследования по изучению данного фактора бесплодия. Но, к сожалению, пока они не завершены и не имеют практического значения.

В случае установления ооцитарного фактора (а понять это возможно только при получении ооцитов при пункции фолликулов) предлагается замена протокола гормональной стимуляции, переход на ЭКО в естественном цикле. При неэффективности этих схем, переход на ЭКО с донорскими ооцитами.

Плохое качество сперматозоидов не так прямо связано с возрастом мужчины, больше с различными внутренними и внешними неблагоприятными факторами, но также может быть причиной неудач ЭКО.

2. Неправильное оплодотворение

В яйцеклетке и сперматозоиде в норме содержится по 23 хромосоме. В процессе оплодотворения в яйцеклетке формируется 2 клеточных ядра (пронуклеуса) — 2 pn — женское и мужское. Оплодотворённая яйцеклетка (зигота) содержит в норме 46 хромосом (23 от матери и столько же от отца).

Пронуклеусы в оплодотворённой яйцеклетке становятся видны через 12-14 ч после проникновения в неё сперматозоида. Через 19-22 часа пронуклеусы исчезают и формируется метафазная пластинка, а ещё через 3-4 часа начинается деление зиготы.

Послее дробления зиготы с аномалиями оплодотворения могут быть неотличимы от нормально оплодотворённых ооцитов. Поэтому наблюдение пронуклеусов имеет важное значение — по их количеству оценивается правильное формирование эмбриона.

Встречаются следующие патологии формирования пронуклеусов:

— 1 pn — присутствие в зиготе одного пронуклеуса может говорить об активации яйцеклетки без участия сперматозоида, реже — о слиянии ядер гамет и образование диплоидной зиготы с одним пронуклеусом;

— 3 pn — наличие 3-х пронуклеусов возможно при :

— * оплодотворении одной яйцеклетки 2-мя сперматозоидами;

— * формирование 3-го пронуклеуса из материала невыделившегося второго полярного тельца;

— * формирование 3-го пронуклеуса путём аномального формирования ядерной мембраны ;

— реже встречаются >3 pn.

ИКСИ (введение одного сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки) не гарантирует правильного оплодотворения. Это объясняется главным образом сохранением второго полярного тела во время второго мейотического деления ооцита. Но 3 pn при этом варианте оплодотворения встречается реже, по разным данным ~ 2-3% против 8-12 % при оплодотворении методом ЭКО.

В неправильном оплодотворении могут играть роль следующие факторы:

— повышенные уровни эстрогенов в стимулированном цикле;

— продолжительность гормональной стимуляции;

— качество сперматозоидов;

— качество ооцита («гигантские» ооциты предрасположены к неправильному оплодотворению);

— поздний репродуктивный возраст женщины (по данным американских учёных H. J. Kang, Z. Rosenwaks частота оплодотворения и 3 pn достоверно выше у пациенток после 39 лет, несмотря на метод оплодотворения)

3. Остановка развития эмбрионов после правильного оплодотворения

В современных эмбриологических лабораториях процесс культивирования эмбрионов отработан до мелочей и тщательно соблюдается: индивидуальное культивирование эмбриона в планшетных инкубаторах; постоянный многоуровневый контроль условий культивирования; своевременная смена питательных сред, если культивирование происходит в двухступенчатых средах.

Поэтому при стабильных условиях культивирования, причину плохого развития остается искать только в качестве самого материала.

На остановку эмбриогенеза влияет качество как самих яйцеклеток, так и качество сперматозоидов.

Как правило, основное влияние на ход эмбриогенеза оказывает возраст родителей. Хотя и в молодом возрасте может наблюдаться снижение качества яйцеклеток, например, при эндометриозе, неясном генезе бесплодия. Причиной могут быть аномалии в хромосомном наборе самих родителей.

Принято считать, что до 3 дня развития эмбрион живет и развивается на материнских запасах, то есть, остановка или ухудшение развития до 3 суток указывает на плохое качество яйцеклетки.

На 3 сутки развития начинает работать сам геном эмбриона. И здесь добавляются факторы, привнесенные в эмбрион сперматозоидом. К сожалению, очень многие отклонения от нормы в качестве сперматозоидов и хроматина внутри них оказывают влияние на развитие эмбриона и могут вызывать анеуплоидии или недостаточность генома эмбриона. Качество конденсации и организации ДНК сперматозоида является важным фактором развития эмбриона, даже при выполнении ИКСИ.

Но есть данные, что некоторое количество материнской мРНК сохраняется до стадии бластоцисты и может также участвовать в остановке развития.

Хромосомные аномалии, несомненно, вызывают большой процент потерь эмбрионов. Генетические факторы регулируют скорость предимплантационного развития эмбриона. Существует тенденция к увеличению количества анеуплоидных эмбрионов с увеличением возраста. Большая часть анеуплоидий летальна для эмбриона на ранних стадиях развития. Но некоторые анеуплоидии не мешают эмбриону стать бластоцистой хорошего качества, например, при трисомии по 21 хромосоме, или синдроме Дауна.

В связи с этим, пациентам позднего репродуктивного возраста рекомендуется проведение предимплантационного генетического скрининга до переноса эмбриона в полость матки.

Кроме того, у пар более молодого возраста, если в нескольких циклах ЭКО при переносе эмбриона хорошего качества на стадии бластоцисты в однородный, достаточной толщины и хорошо кровоснабжающийся эндометрий беременность не наступает, необходимо выполнение предимплантационного генетического скрининга на все хромосомы. И, соответсвенно, переносить в полость матки эмбрион только с полным хромосомным набором.